人蛋白二硫化物異構酶PDIA3試劑盒
人蛋白二硫化物異構酶PDIA3試劑盒(Human Protein Disulfide Isomerase A3 Kit,PDIA3 Kit),又稱人蛋白二硫鍵異構酶A3試劑盒,是基于酶聯免疫吸附法(ELISA)原理研發的體外診斷/科研檢測試劑盒,可特異性檢測人血清、血漿、組織勻漿及細胞培養上清中人蛋白二硫化物異構酶PDIA3的含量,經特異性驗證、靈敏度測試及重復性實驗確認,無交叉反應,檢測結果準確可靠,無試劑降解、雜菌污染等問題。蛋白二硫化物異構酶PDIA3(PDIA3)是蛋白二硫化物異構酶(PDI)家族成員,核心功能是催化蛋白質二硫鍵的形成、斷裂與異構化,參與蛋白質折疊、成熟及轉運,主要定位于內質網,同時可分泌至細胞外,其異常表達與內質網應激、自身免疫性疾病、腫瘤、心血管疾病及神經退行性疾病密切相關,是評估內質網功能、蛋白質折疊狀態、相關疾病輔助診斷、病情監測及藥物篩選的重要指標。本試劑盒核心特征是特異性強、操作便捷、檢測快速,可精準定量樣本中PDIA3含量,廣泛應用于臨床檢驗、分子生物學科研、自身免疫病檢測、藥物篩選等領域,是臨床、科研領域的核心蛋白質折疊調控相關檢測工具。
檢測原理
本試劑盒的核心檢測原理,基于酶聯免疫吸附法(ELISA),聚焦人蛋白二硫化物異構酶PDIA3的抗原抗體特異性結合特性,結合蛋白質折疊調控相關指標檢測的精準需求設計:試劑盒預先將PDIA3特異性抗體包被于酶標板上,加入待檢測樣本(血清、血漿等)后,樣本中的PDIA3會與酶標板上的抗體特異性結合,形成抗原-抗體復合物;洗滌去除未結合的雜蛋白、細胞碎片、其他PDI家族成員(如PDIA1)及無關蛋白后,加入辣根過氧化物酶(HRP)標記的PDIA3二抗,與復合物特異性結合,形成“包被抗體-PDIA3-酶標二抗"的三明治結構;再加入底物液(TMB),HRP催化底物發生顯色反應,顯色強度與樣本中PDIA3的含量呈正相關,通過酶標儀在450nm波長下測定吸光度(OD值),對照標準曲線即可計算出樣本中PDIA3的具體含量。檢測流程規范:樣本采集后需及時處理(血清/血漿離心分離、細胞上清收集、組織勻漿破碎離心),按照試劑盒說明書稀釋樣本;酶標板平衡至室溫后,依次加入標準品、樣本及空白對照,37℃孵育30分鐘;洗滌3-5次后加入酶標二抗,37℃孵育20分鐘;再次洗滌后加入底物液,37℃避光孵育15分鐘;加入終止液終止反應,10分鐘內用酶標儀測定OD值,計算檢測結果。
產品特點
本產品針對人蛋白二硫化物異構酶PDIA3檢測需求優化制備,核心特點如下:
1. 特異性強:采用高特異性PDIA3單克隆抗體,可特異性結合樣本中的PDIA3,不與PDIA1、PDIA2等其他PDI家族成員及雜蛋白發生交叉反應,檢測特異性>99%,確保檢測結果精準,有效規避蛋白質折疊調控相關檢測中的干擾因素;
2. 質控嚴格:每批次試劑盒均通過靈敏度、重復性、特異性及穩定性檢測,附完整QC報告,確保批內變異系數(CV)<8%、批間變異系數(CV)<10%,檢測靈敏度可達0.1ng/mL,符合臨床檢測與科研標準;
3. 操作便捷:試劑盒含全套檢測試劑(包被酶標板、PDIA3標準品、酶標二抗、底物液、終止液、洗滌液等),無需額外配制核心試劑,步驟簡單,全程可在2.5小時內完成,適配常規實驗室操作,新手易上手;
4. 樣本兼容廣:可適配人血清、血漿、細胞培養上清、組織勻漿四種核心樣本類型,樣本用量少(僅需50μL/孔),無需復雜預處理,僅需簡單離心、稀釋即可檢測,適配自身免疫病、腫瘤、神經退行性疾病等相關科研與臨床多場景樣本;
5. 適配場景廣:可用于類風濕關節炎、系統性紅斑狼瘡等自身免疫性疾病,肺癌、肝癌等腫瘤,阿爾茨海默病、帕金森病等神經退行性疾病的輔助診斷與療效監測,內質網應激與蛋白質折疊調控機制研究,抗炎、抗腫瘤及神經保護藥物篩選,以及臨床檢驗、風濕免疫科、腫瘤科、分子生物學科研實驗室的常規檢測。
適用樣本類型
本試劑盒適配人源樣本的體外檢測與科研實驗,適用樣本類型明確:人血清樣本(靜脈采血后離心分離,避免溶血,溶血會干擾檢測結果)、人血漿樣本(EDTA或肝素抗凝,離心分離)、人細胞培養上清樣本(腫瘤細胞、肝細胞、神經細胞、免疫細胞對數期上清,離心去除雜質)、人組織勻漿樣本(肝組織、腦組織、腫瘤組織、炎癥組織等破碎后離心取上清);實驗場景涵蓋類風濕關節炎、系統性紅斑狼瘡等自身免疫性疾病,肺癌、肝癌等腫瘤,阿爾茨海默病、帕金森病等神經退行性疾病的輔助診斷與療效監測,內質網應激與PDIA3調控機制研究,抗炎、抗腫瘤及神經保護藥物篩選與效果評估,以及相關實驗室的常規檢測。推薦檢測體系:使用試劑盒配套酶標板,酶標儀(波長450nm),按照說明書步驟操作;樣本稀釋比例為1:10(組織勻漿可根據濃度適當調整),標準品濃度梯度為0、0.1、0.2、0.4、0.8、1.6ng/mL,參考區間為0.2~1.3ng/mL(具體以說明書為準)。(具體樣本處理方法請參考產品說明書)
儲存與注意事項
1. 試劑盒需全程2-8℃避光冷藏儲存,嚴禁-20℃冷凍或常溫放置,避免溫度波動導致試劑降解、抗體活性喪失;
2. 標準品、酶標二抗等試劑開封后,密封冷藏保存,1個月內用完,PDIA3標準品避免反復凍融,防止其蛋白結構破壞,底物液需避光保存;
3. 樣本采集后及時處理,血清/血漿冷藏24小時內完成檢測,細胞上清、組織勻漿冷藏或-20℃短期保存,48小時內完成檢測,避免樣本變質、PDIA3降解;
4. 操作時嚴格遵循無菌規范,佩戴防護用品,避免試劑、樣本接觸皮膚黏膜;檢測過程中控制孵育溫度與時間,洗滌充分,避免未結合試劑殘留導致結果偏差;
5. 底物液具有潛在刺激性,終止液為酸性溶液,操作時需謹慎,避免接觸衣物與皮膚,檢測完成后按生物安全規范處理廢棄試劑與酶標板;
6. 腦組織、腫瘤組織等樣本需無菌采集,充分破碎離心去除組織碎片及細胞雜質后再進行檢測,避免雜質干擾檢測結果;血清/血漿樣本需避免溶血,溶血會影響PDIA3檢測準確性,同時避免蛋白酶污染導致PDIA3蛋白降解。
訂購信息
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以上信息僅供參考,具體請已產品說明書為準。